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暗視野顯微鏡和倒置顯微鏡的判斷

[2013/9/29]

  (一)倒置顯微鏡

  在細胞培養(yǎng)、組織培養(yǎng)和微生物研究中,常用倒置顯微鏡進行觀測,其光路原理如圖3—25所示。柯拉照明系統(tǒng)的光源(1)發(fā)出的光線經(jīng)聚光器(2)后照亮標本(4).3為孔徑光鬧,(13)則為機場光闊。標本經(jīng)物鏡組(5)、轉(zhuǎn)像系統(tǒng)(6,7,8,9,10,11)后成像在目鏡(12)的物方焦平面上,人眼通過目鏡組進行觀測。為廠觀測方便,轉(zhuǎn)像系統(tǒng)的設計應使系統(tǒng)所成的像為完全一致的像。

  照明系統(tǒng)位于載物臺(物體)之上,而物鏡組則在載物臺之下,其相對位置恰好和一般生物顯微鏡相反,“倒置”二字即內(nèi)此而得。

  (二)暗視場顯微鏡

  暗視場顯微鏡又叫做暗視野顯微鏡,它與普通明視場顯微鏡的主要區(qū)別是照明方式不同。普通顯微鏡是讓光速透過標本后直接進入物鏡,所以視場是明亮的,暗視場顯微鏡卻用強而窄的光束照射標本,而又不讓光束直接進人物鏡。但由于標本中的微粒能夠散射光線,這些散射光中,有一部分能夠進人物鏡。因此,在黑暗的背景上,能看見標本中微粒的閃爍光點,好僚微粒本身在發(fā)光一樣。這道理正如一間暗室內(nèi),從墻上的小孔射人一束強烈的陽光,能夠在光路上看見灰塵的存在一樣。這種現(xiàn)象,在光學上稱為丁達爾(Tyndall)現(xiàn)象。暗視場顯微鏡就是根據(jù)這一原理設計的。

  普通明視場顯微鏡,在中心照明的情況下,極限只能分辨0.2μm的細節(jié),但暗視場顯微鏡可以分辨0.004μm以上的微粒的存在。也就是說,用普通顯微鏡看不見的微粒,利用暗視場顯微鏡可以看見。但由于暗現(xiàn)場顯微鏡是利用被檢物體表面散射的光線來觀察物體的,因此只能看到物體的外表輪廓和運動狀態(tài),而不能辨認其內(nèi)部結構。

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